《史话河南》•非遗篇：以匠心传承千年“酒香”

发电行业碳排放权交易方案表示燃气机组配额清缴量以免费配额量为限，对燃气机组的碳排放控制更为宽松。

这种引力的大小与两电荷间距离的平方成反比，平均键能约为20.9 kJ/mol。(1)多克隆抗体：多克隆抗体(polyclonal antibody，PcAb)是指由多株B细胞产生的、针对不同抗原决定簇的抗体的混合物。

(4)氢键：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力构成氢键。轻链(light chain，L)和重链(heavy chain，H)各含有3个高变区，其表面为抗原结合部位(antigen binding site)。在同一免疫球蛋白分子中，两条轻链是同型(isotype)的。该区称为铰链区(hinge regiorl)。1、免疫球蛋白的类型与结构：免疫球蛋白分子由4条多肽链组成，两条短链称为轻链(1ight chain，L)，分子质量约为25ku。

氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次方成反比，键能约为20.9 kJ/mol。基因工程抗体技术的发展使人工设计和制备具有特殊性质、特殊功能的抗体成为可能。用1mol／LKOH、10mol／LKOH及5％(v／v)高氯酸将上清液pH调节至6.4～6.5，沉淀物用2mLpH6.45，5％(v／v)高氯酸在3600r／min下离心洗涤3min，收集所有上清液并用pH6.45，5％(v，v)高氯酸定容至10mL，过0.45m微孔滤膜，供液相色谱仪检测ATP及相关化合物。

添加了迷迭香提取物的鱼鳞明胶(F-R和F-R-P)，在链1和链2之间的蛋白质量有所增加，但＜31KDa的小分子水解物没有明显增加，新的蛋白片段可能位于谱图的上部区域。二、结果与讨论1、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析众所周知，多酚具有与蛋白质形成复合物的能力，从而导致蛋白沉淀，但也有研究表明，蛋白质沉淀主要是由单宁引起的，本实验所用的迷迭香水提物中不含这类高分子多酚聚合物，因此，没有明显的蛋白质沉淀。（6）统计分析所有数据通过SPSS21.0软件处理，ANOVA法进行方差分析，采用LSD最小显著性差异法进行显著性分析(P＜0.05)。然而，低分子量的多酚类物质对明胶没有明显的增强作用，并可能影响到明胶的理化性质。

F1组样品在第18天时，菌落总数为6.99logCFU／g，第22天时，F3组样品菌落总数为6.95logCFU／g，F1组与F3组在贮藏18天时无显著性差异。这一结果显示，迷迭香提取物中的多酚类物质与鱼鳞多肽之间存在一定的相互作用。

如图1所示，薄层电泳分析显示，纯鱼鳞明胶的分析量非常相近，与对照明胶溶液(F)相比，鱼鳞明胶溶液中加入植酸(F-P)对电泳谱图几乎没有影响添加了迷迭香提取物的鱼鳞明胶(F-R和F-R-P)，在链1和链2之间的蛋白质量有所增加，但＜31KDa的小分子水解物没有明显增加，新的蛋白片段可能位于谱图的上部区域。最初鲫鱼的菌落总数为4.7logCFU／g，FO组样品从第4天开始显著加快，在贮藏到第6天时，F2和F4组样品的菌落总数也分别达到7.751ogCFU／g和7.671ogCFU／g，与F0组的7.62logCFU／g相接近，无显著差异p＞0.05)。④K-值的测定在2g鱼肉样品中加入2mL5％(v／v)的高氯酸后均质，并在3600r／min下离心3min，重复3次，收集每次上清液。

⑥感官评定由10名经过培训的专业人员采用9点快感标度法对鱼的品质进行感官评定，评定指标包括色泽、香气、滋味、质地和总体可接受程度，评价标准：9分为非常喜欢，8分为比较喜欢，7分为一般喜欢，6分为稍微喜欢，5分为既不喜欢也不讨厌，4分为稍微不喜欢，但仍可接受，3分为一般厌恶，2分为比较厌恶，1分为非常厌恶。用1mol／LKOH、10mol／LKOH及5％(v／v)高氯酸将上清液pH调节至6.4～6.5，沉淀物用2mLpH6.45，5％(v／v)高氯酸在3600r／min下离心洗涤3min，收集所有上清液并用pH6.45，5％(v，v)高氯酸定容至10mL，过0.45m微孔滤膜，供液相色谱仪检测ATP及相关化合物。从图中可以看出，F1和F3组中菌落总数得到明显抑制，这是由于鱼鳞明胶对腐败细菌的抑制作用，而不是植酸的作用。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。

如图1所示，薄层电泳分析显示，纯鱼鳞明胶的分析量非常相近，与对照明胶溶液(F)相比，鱼鳞明胶溶液中加入植酸(F-P)对电泳谱图几乎没有影响。F1组样品在第18天时，菌落总数为6.99logCFU／g，第22天时，F3组样品菌落总数为6.95logCFU／g，F1组与F3组在贮藏18天时无显著性差异。

有研究表明，迷迭香提取物并不能抑制绿脓杆菌和假单胞菌的生长，但是假单胞菌是引起鱼类腐败的重要原因之一。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：三磷酸腺苷，菌落总数，绿脓杆菌，迷迭香，丙烯酰胺。

色谱条件：色谱柱(VP-CDSC18)。然而，低分子量的多酚类物质对明胶没有明显的增强作用，并可能影响到明胶的理化性质。（6）统计分析所有数据通过SPSS21.0软件处理，ANOVA法进行方差分析，采用LSD最小显著性差异法进行显著性分析(P＜0.05)。鱼肉组织中的三磷酸腺苷(ATP)会随着时间的延长分解成二磷腺苷(ADP)、腺苷酸(AMP)、肌苷酸(IMP)、次黄嘌呤核苷(HxR)和次黄嘌呤(Hx)化合物。二、结果与讨论1、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析众所周知，多酚具有与蛋白质形成复合物的能力，从而导致蛋白沉淀，但也有研究表明，蛋白质沉淀主要是由单宁引起的，本实验所用的迷迭香水提物中不含这类高分子多酚聚合物，因此，没有明显的蛋白质沉淀。因此，为迅速而精准地测定鱼肉新鲜度，通过高效液相色谱测定鱼肉中的这些化合物含量及其比例作为ATP分解程度的指标，作为K值评定其新鲜度，K值计算公式如下：⑤重量损失每10条鲫鱼为一组，分别在实验开始及每个贮藏阶段结束后进行称重分析，结果以初始重量损失的百分比表示。

2、鲫鱼的贮藏试验（1）抑菌试验水产品的腐败变质大多数是由于微生物的作用而引起的，在运输和贮藏过程中都会产生微生物的污染，而微生物在生长繁殖过程中会生成酶和毒性物质，使肌肉组织发生分解进而发生变质。微生物的耐低温能力强，4℃低温不足以遏制微生物的生长，通过细菌总数的变化可以判断鲫鱼的鲜度，结果如图2所示，贮藏初期，对照组与处理组样品的菌落总数差异并不明显(p＞0.05)，随着贮藏时间的延长，所有样品的菌落总数均呈上升趋势。

这一结果显示，迷迭香提取物中的多酚类物质与鱼鳞多肽之间存在一定的相互作用。每个样品的感官分值去掉最高和最低评分后取其平均值

牛血清白蛋白：杭州吴天生物技术服务有限公司提供。半微量蒸馏装置(KDY-9820)：北京瑞邦兴业科技有限公司。

如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：胃蛋白酶，植酸，没食子酸，冰乙酸，-硫代巴比妥酸。近些年，许多学者对鱼皮膜越来越感兴趣，Gimenez等人证明，通过在鱿鱼明胶中加入一种碱性蛋白酶进行水解后，制备得到的鱿鱼明胶膜的抗氧化性明显提高。鲫鱼是我国主要的淡水鱼类之一，被广泛用作许多鱼类制品的原料。③-硫代巴比妥酸(TBA)值的测定TBA值的测定采用Krik和Sawyer所采用的方法。

植酸做为一种金属螯合剂，在颜色保护和抗氧化方面发挥着重要作用，在鱼鳞膜中加入植酸，也希望可以提高鱼鳞膜的抗氧化性和感官特性。用1mol／LNaOH将溶液pH调回至7.0，用纱布过滤明胶溶液并混匀，将匀浆于3600r／min下离心3min，将所得上清液用旋转蒸发仪于60℃旋转蒸发30min，将浓缩明胶溶液(蛋白含量：28.56mg／mL)于4℃下贮藏，蛋白含量采用双缩脲法测定心，结果为三次测定的平均值。

每2天随机抽取鲫鱼样品进行微生物、化学和感官分析，每个样品平行测定三次。F4组：鲫鱼表面涂有含20099／mL迷迭香提取物及200g／mL植酸的鱼鳞明胶液(25mg／mL)。

将明胶溶液与去离子水混合，然后与上样缓冲液(100mmol／LTris-HCL、1.6％SDS、8％甘油、8mmol／L巯基乙醇和0.02％溴酚蓝)按1:1的比例混合，蛋白质终浓度1mg／mL。Fl组：鲫鱼表面涂有鱼鳞明胶液(25mg／mL)。

F0组：对照组，鲫鱼表面不涂膜。而近年来，具有抗氧化活性的天然多酚类物质迷迭香提取物，越来越多的被应用到食品中，迷迭香提取物的抗氧化性和抑菌性已被广泛证实。植酸：上海医药临床研究中心。多酚含量采用F01in-酚法测定，以没食子酸为标准品，用紫外分光光度计于750nm下测定，结果为三次测定平均值，总酚浓度(g／mL)以没食子酸计。

F2组：鲫鱼表面涂有含200g／mL迷迭香提取物的鱼鳞明胶液(25mg／mL)。准确称取10g迷迭香叶，研磨碎后，在65℃下提取10min，将提取物置于旋转蒸发仪中于60℃下蒸馏30min，其多酚含量达2448.56g／mL。

在统计分析之前，将细菌数转化为log10菌落形成单位／克(CFU／g)，每个样品重3次，计算平均值。而鱼鳞作为鲫鱼生产加工过程的下脚料，含有丰富的胶原蛋白，其酶解产物具有抑制微生物生长和汁液流失的作用，通过鱼鳞明胶制备可食膜覆盖鱼体，既可以废物利用，又可以延长鱼类的保质期，保持鱼类固有的风味。

待溴酚蓝指示剂到达凝胶底部边缘时可停止电泳，取出并撬开玻璃板，取出凝胶，染色、脱色，直到蛋白区带清晰，进行图像扫描，直到找到光密度值有差异的条带。准确称取10.00g研磨后的样品，并加入100mL去离子水，均匀搅拌并震荡30min，在离心机5000r／min离心10min，得到上清液，过滤，定容，采用半微量定氮法测得，每隔2天测定一次。